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    黃芩素和野黃芩素的合成取得進展

    2018年12月10日      家庭醫生在線

    黃芩素(Baicalein)是一種黃酮類化合物,是從唇形科多年生草本中藥植物黃芩(Scutellariabaicalensis Georgi)的干燥根中提取的主要活性成分,也是中藥黃芩發揮藥理作用的物質基礎之一。

    近年來,大量的體內外實驗均證明,黃芩素具有抗化、抗炎癥、抗凋亡以及改善學習記憶能力等廣泛的生物學活性及藥理學活性,其作用譜廣、作用位點多、作用機制雜多樣,有望成為安全、價廉且廣譜的有效抗腫瘤藥物及治療阿爾茨海默癥的潛在理想藥物。野黃芩素則主要存在于菊科植物燈盞花(Erigeron karvinskianus)中,具有消炎止痛、活血化瘀和祛風除濕等功效。這兩種化合物均有望開發成新型藥物造福人類,但其在植物中的天然含量較少,如何高效低成本地獲得高純度化合物是目前研究開發急需解決的問題。利用合成生物學技術實現高效定向合成和規?;苽?,是解決上述困難的有效途徑。

    雖然這兩種化合物來源于不同的植物,但其結構具有相似性,其區別在于黃酮母核B環4’位是否有羥基取代。鑒于此,研究者用7個不同物種來源的11個基因構建了一種能定向合成黃芩素或野黃芩素的大腸桿菌,只需提供苯丙氨酸酪氨酸兩種不同的前體,就可以獲得這兩種重要的黃酮化合物。

    研究者先將來自歐芹(Petroselinum crispum)的4CL、FNS I,紅酵母(Rhodotorulatoruloides)的PAL、矮牽牛(Petunia hybrida)的CHS、苜蓿(Medicago sativa)的CHI等酶的基因構建了黃酮的重要中間體白楊素/芹菜素的合成模塊。進一步通過克隆黃芩(Scutellaria baicalensis Georgi)來源的F6H及擬南芥(Arabidopsis thaliana)的AtCPR基因,并引入了不同的助溶標簽優化其表達,實現了黃芩素和野黃芩素的異源合成。

    在此基礎上,研究者進一步針對丙二酰輔酶A這一重要前體的供應進行了改造,通過過量表達丙二酰輔酶A合成基因acs和脂肪酸合成基因fabF,并引入三葉草根瘤菌(Rhizobium trifolii)來源的丙二酰輔酶A合酶(malonyl-CoA synthetase)基因matB與丙二酸鹽載體蛋白(malonate carrier protein)基因matC,最終在大腸桿菌中實現了搖瓶水平黃芩素23.6 mg/L和野黃芩素106.5 mg/L的產量。該研究為黃芩素和野黃芩素的規?;_發和制造提供了一個不依賴于植物提取的替代方案,也為其他黃酮類化合物的合成生物學制造提供了可借鑒的策略。

    (責任編輯:沈麗娜 )

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